Q高流速瓊脂糖微球是將三甲胺基烷基季銨基團(tuán)鍵合在高流速瓊脂糖微球上形成的一種強(qiáng)陰離子交換介質(zhì)。廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。

　　1. 外觀

　　本品呈白色，球狀、無嗅、無味、無肉眼可見雜質(zhì)。

　　2. 理化指標(biāo)

項     目	指     標(biāo)
離子交換基團(tuán)	-CH2N+(CH3)3
離子交換類型	強(qiáng)陰離子，可交換離子Cl-
基   質(zhì)	6% 交聯(lián)瓊脂糖**
蛋白質(zhì)吸附容量	120mgHSA/ml 介質(zhì)
總離子交換量	0.18-0.25mmol/ml 介質(zhì)
形狀	球形
粒徑	50~160 μm
流    速	400~700 cm/h*   最大流速750 cm/h
工作溫度	4~40 ℃
耐熱	pH7水中120℃30min
耐壓	0.3MPa
pH值穩(wěn)定性	1~14 (短時間，在位清洗)；2~12(長時間)
pH工作范圍	2~12
化學(xué)穩(wěn)定性	在以下液體中穩(wěn)定：所有常用的水相緩沖液；1mol/L 氫氧化鈉；8mol/L 尿素；6mol/L 鹽酸胍；70% 乙醇

　　*檢測條件： 層析柱10mm×300mm  *柱床高15cm,25℃, 流動相為0.1mol/LNaCl

　　3. pH滴定曲線：

           

　　4． 包裝

　　產(chǎn)品以聚胺酯瓶密封包裝，外貼標(biāo)簽，注明“品名、體積、顆粒大小、保質(zhì)期、批號、生產(chǎn)日期、生產(chǎn)單位及地址” 等內(nèi)容。

　　5．運輸

　　運輸中應(yīng)避免日曬、雨淋、重壓，嚴(yán)禁與有毒、有害物品混運。

　　6． 貯存

　　產(chǎn)品應(yīng)密封貯存在4℃~25℃（保存溶液為20% 乙醇），通風(fēng)、干燥、清潔的地方。不能冷凍。

　　用過的柱子貯存在4℃（20% 乙醇）。

　　7.注意事項

　　本產(chǎn)品避免與氧化劑接觸；避免在pH值 < 4時長時間暴露(一周,20℃)。

　　8.保質(zhì)期：暫定5年。

　　9.應(yīng)用

　　本產(chǎn)品具有高化學(xué)穩(wěn)定性、高流速、高載量、好的機(jī)械性能、可在位清洗、多次重復(fù)使用等特點，非特異性吸附低，回收率高，適用于工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)，適用于在pH工作范圍內(nèi)可形成負(fù)離子的生物大分子的分離純化，廣泛用于生物制藥和生物工程下游蛋白質(zhì)、核酸及多肽的離子交換制備。

　　下面簡要介紹介質(zhì)的使用過程。

　　9.1 裝柱

　　⑴ 讓所有的材料和試劑達(dá)到室溫。配制初始緩沖液（平衡液）和洗脫緩沖液。

　　⑵ 根據(jù)柱子大小取所需量的凝膠，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始緩沖液（按凝膠：緩沖液=3：1的比例）配成勻漿。勻漿作脫氣處理。

　　⑶ 將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液位（液面略高于濾膜），務(wù)必使底端無氣泡。

　　⑷ 用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)，注意勿使產(chǎn)生氣泡。打開柱子出液口，使凝膠在柱內(nèi)自由沉降，連結(jié)好柱子頂端柱頭。

　　⑸ 打開蠕動泵，讓緩沖液用使用時流速的1.33倍的流速流過，使柱床穩(wěn)定。用2~3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。

　　9.2平衡

　　讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子，到流出液電導(dǎo)和pH不變。平衡液是低濃度的緩沖溶液，如Tris 、PBS等。

　　9.3上樣

　　⑴ 樣品用平衡液配制，渾濁的樣品要離心和過濾后上樣。鹽濃度太大的樣品處理后再配。

　　⑵ 一般情況是讓目標(biāo)產(chǎn)品結(jié)合在柱子上，用平衡液洗去雜質(zhì)，再選擇一種洗脫液洗下目標(biāo)產(chǎn)品。

　　⑶ 介質(zhì)對樣品組分吸附的程度取決于樣品的帶電性質(zhì)、流動相的離子強(qiáng)度和pH值。鹽濃度小，介質(zhì)對樣品組分吸附較牢。用Q瓊脂糖介質(zhì)時，推薦的pH值是大于目標(biāo)產(chǎn)品等電點1個單位。

　　9.4洗脫

　　Q瓊脂糖介質(zhì)可用增大鹽濃度或減小pH值進(jìn)行洗脫，常用增大鹽濃度的辦法洗脫。

　　9.5再生

　　一般用高鹽濃度的緩沖液（含1~2mol/L NaCl）洗或減小pH洗10倍以上柱體積，接著用結(jié)合蛋白時的平衡液洗到平衡，可再次使用。

　　若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時洗不掉，可用在位清洗（CIP）除去。

　　9.6 在位清洗

　　⑴ 對于以離子鍵結(jié)合上去的蛋白，可以用2M Nacl去除。

　　⑵ 對沉淀蛋白、對以疏水性結(jié)合的蛋白或脂類，可用1M NaOH 去除。

　　⑶ 對強(qiáng)疏水性結(jié)合的蛋白、脂類等，用4~10倍柱體積的70%乙醇或30%異丙醇清洗，但要注意有機(jī)溶劑的濃度以梯度的方式逐漸增加，否則容易產(chǎn)生氣泡。

　　清洗完畢后，用至少3倍緩沖液平衡柱子。

　　9.7 注意

　　在裝柱、使用和保存柱子的時候，要避免柱子流干，氣泡進(jìn)入。

　　9.8 去熱源

　　用0.5M的氫氧化鈉清洗柱子5~6小時或用0.1M的氫氧化鈉24小時。或用以下方法步驟去除：

　　⑴ 2倍柱體積的70%乙醇

　　⑵ 2倍柱體積50mM Tris-Hcl pH7.5

　　⑶ 1倍柱體積4M尿素

　　⑷ 3倍柱體積的Tris緩沖液+0.1M Nacl

　　以上緩沖液都在無熱源的雙蒸水中配制

　　9.9 消毒

　　用0.5~1M NaOH室溫下洗8~10倍柱體積，初始緩沖液平衡柱子。

　　9.10 滅菌

　　置介質(zhì)于高壓滅菌鍋中120℃下30分鐘。